Ang Visceral leishmaniasis (VL), na kilala bilang kala-azar sa subcontinent ng India, ay isang parasitic na sakit na dulot ng flagellated protozoan na Leishmania na maaaring nakamamatay kung hindi magamot kaagad. Ang sandfly Phlebotomus argentipes ay ang tanging kumpirmadong vector ng VL sa Southeast Asia, kung saan ito ay kinokontrol ng panloob na residual spraying (IRS), isang synthetic insecticide. Ang paggamit ng DDT sa mga VL control program ay nagresulta sa pagbuo ng resistensya sa mga sandflies, kaya ang DDT ay pinalitan ng insecticide alpha-cypermethrin. Gayunpaman, ang alpha-cypermethrin ay gumaganap ng katulad sa DDT, kaya ang panganib ng resistensya ng mga sandflies ay tumataas sa ilalim ng stress na dulot ng paulit-ulit na pagkakalantad sa insecticide na ito. Sa pag-aaral na ito, sinuri namin ang pagkamaramdamin ng mga ligaw na lamok at ang kanilang F1 progeny gamit ang CDC bottle bioassay.
Nangolekta kami ng mga lamok mula sa 10 nayon sa Muzaffarpur district ng Bihar, India. Walong nayon ang patuloy na gumamit ng mataas na lakascypermethrinpara sa panloob na pag-spray, isang nayon ang huminto sa paggamit ng high-potency na cypermethrin para sa panloob na pag-spray, at isang nayon ay hindi kailanman gumamit ng high-potency na cypermethrin para sa panloob na pag-spray. Ang mga nakolektang lamok ay nalantad sa isang paunang natukoy na diagnostic na dosis para sa isang tinukoy na oras (3 μg / ml para sa 40 min), at ang knockdown rate at dami ng namamatay ay naitala 24 h pagkatapos ng pagkakalantad.
Ang mga rate ng pagpatay ng mga ligaw na lamok ay mula 91.19% hanggang 99.47%, at ang mga nasa kanilang F1 na henerasyon ay mula 91.70% hanggang 98.89%. Dalawampu't apat na oras pagkatapos ng pagkakalantad, ang dami ng namamatay sa mga ligaw na lamok ay mula 89.34% hanggang 98.93%, at ang kanilang F1 generation ay mula 90.16% hanggang 98.33%.
Ang mga resulta ng pag-aaral na ito ay nagpapahiwatig na ang paglaban ay maaaring umunlad sa P. argentipes, na nagpapahiwatig ng pangangailangan para sa patuloy na pagsubaybay at pagbabantay upang mapanatili ang kontrol kapag ang pagpuksa ay nakamit.
Ang Visceral leishmaniasis (VL), na kilala bilang kala-azar sa subcontinent ng India, ay isang parasitic na sakit na dulot ng flagellated protozoan na Leishmania at naililipat sa pamamagitan ng kagat ng mga nahawaang babaeng langaw sa buhangin (Diptera: Myrmecophaga). Ang mga langaw sa buhangin ay ang tanging kumpirmadong vector ng VL sa Southeast Asia. Malapit nang makamit ng India ang layunin na alisin ang VL. Gayunpaman, upang mapanatili ang mababang mga rate ng saklaw pagkatapos ng pagtanggal, kritikal na bawasan ang populasyon ng vector upang maiwasan ang potensyal na paghahatid.
Ang pagkontrol sa lamok sa Timog Silangang Asya ay nagagawa sa pamamagitan ng panloob na residual spraying (IRS) gamit ang synthetic insecticides. Ang lihim na pag-uugali ng pagpapahinga ng mga silverleg ay ginagawa itong angkop na target para sa pagkontrol ng insecticide sa pamamagitan ng panloob na natitirang pag-spray [1]. Ang panloob na natitirang pag-spray ng dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT) sa ilalim ng National Malaria Control Program sa India ay nagkaroon ng makabuluhang spillover effect sa pagkontrol sa populasyon ng lamok at makabuluhang pagbabawas ng mga kaso ng VL [2]. Ang hindi planadong kontrol na ito ng VL ay nag-udyok sa Indian VL Eradication Program na magpatibay ng panloob na natitirang pag-spray bilang pangunahing paraan ng pagkontrol ng silverlegs. Noong 2005, nilagdaan ng mga pamahalaan ng India, Bangladesh, at Nepal ang isang memorandum of understanding na may layuning alisin ang VL sa 2015 [3]. Ang mga pagsisikap sa pagtanggal, na kinasasangkutan ng kumbinasyon ng kontrol ng vector at mabilis na pagsusuri at paggamot sa mga kaso ng tao, ay naglalayong pumasok sa yugto ng pagsasama-sama sa 2015, isang target na kasunod na binago sa 2017 at pagkatapos ay 2020.[4] Kasama sa bagong pandaigdigang roadmap para alisin ang napapabayaang mga tropikal na sakit ay ang pag-aalis ng VL pagsapit ng 2030.[5]
Sa pagpasok ng India sa post-eradication phase ng BCVD, kailangang tiyakin na ang makabuluhang pagtutol sa beta-cypermethrin ay hindi bubuo. Ang dahilan ng paglaban ay ang parehong DDT at cypermethrin ay may parehong mekanismo ng pagkilos, ibig sabihin, target nila ang VGSC protein [21]. Kaya, ang panganib ng pag-unlad ng resistensya sa mga sandflies ay maaaring tumaas ng stress na dulot ng regular na pagkakalantad sa napakalakas na cypermethrin. Samakatuwid, kinakailangan na subaybayan at tukuyin ang mga potensyal na populasyon ng sandfly na lumalaban sa insecticide na ito. Sa kontekstong ito, ang layunin ng pag-aaral na ito ay subaybayan ang katayuan ng pagkamaramdamin ng mga wild sandflies gamit ang mga diagnostic na dosis at mga tagal ng pagkakalantad na tinutukoy ng Chaubey et al. [20] pinag-aralan ang P. argentipes mula sa iba't ibang nayon sa Muzaffarpur district ng Bihar, India, na patuloy na gumagamit ng mga panloob na sistema ng pag-spray na ginagamot sa cypermethrin (continuous IPS villages). Ang katayuan ng pagkamaramdamin ng mga ligaw na P. argentipes mula sa mga nayon na huminto sa paggamit ng cypermethrin-treated indoor spraying system (dating IPS villages) at ang mga hindi kailanman gumamit ng cypermethrin-treated indoor spraying system (non-IPS villages) ay inihambing gamit ang CDC bottle bioassay.
Sampung nayon ang napili para sa pag-aaral (Larawan 1; Talahanayan 1), kung saan walo ang may kasaysayan ng tuloy-tuloy na panloob na pag-spray ng synthetic pyrethroids (hypermethrin; itinalaga bilang tuloy-tuloy na hypermethrin village) at nagkaroon ng mga kaso ng VL (kahit isang kaso) sa nakalipas na 3 taon. Sa natitirang dalawang nayon sa pag-aaral, isang nayon na hindi nagpatupad ng panloob na pag-spray ng beta-cypermethrin (hindi panloob na pag-spray na nayon) ang napili bilang control village at ang isa pang nayon na may pasulput-sulpot na panloob na pag-spray ng beta-cypermethrin (intermittent indoor spraying village/dating indoor spraying village) ang napili bilang control village. Ang pagpili sa mga nayong ito ay batay sa koordinasyon sa Health Department at sa Indoor Spraying Team at pagpapatunay ng Indoor Spraying Micro Action Plan sa Muzaffarpur District.
Heograpikal na mapa ng distrito ng Muzaffarpur na nagpapakita ng mga lokasyon ng mga nayon na kasama sa pag-aaral (1–10). Mga lokasyon ng pag-aaral: 1, Manifulkaha; 2, Ramdas Majhauli; 3, Madhubani; 4, Anandpur Haruni; 5, Pandey; 6, Hirapur; 7, Madhopur Hazari; 8, Hamidpur; 9, Noonfara; 10, Simara. Inihanda ang mapa gamit ang QGIS software (bersyon 3.30.3) at Open Assessment Shapefile.
Ang mga bote para sa mga eksperimento sa pagkakalantad ay inihanda ayon sa mga pamamaraan ng Chaubey et al. [20] at Denlinger et al. [22]. Sa madaling sabi, ang 500 mL na bote ng salamin ay inihanda isang araw bago ang eksperimento at ang panloob na dingding ng mga bote ay pinahiran ng ipinahiwatig na pamatay-insekto (ang diagnostic na dosis ng α-cypermethrin ay 3 μg/mL) sa pamamagitan ng paglalagay ng acetone solution ng insecticide (2.0 mL) sa ilalim, dingding at takip ng mga bote. Ang bawat bote ay pagkatapos ay tuyo sa isang mechanical roller para sa 30 min. Sa panahong ito, dahan-dahang tanggalin ang takip upang payagan ang acetone na sumingaw. Pagkatapos ng 30 min ng pagpapatuyo, tanggalin ang takip at paikutin ang bote hanggang ang lahat ng acetone ay sumingaw. Ang mga bote ay iniwang bukas upang matuyo sa magdamag. Para sa bawat replicate na pagsubok, isang bote, na ginamit bilang kontrol, ay pinahiran ng 2.0 mL ng acetone. Ang lahat ng mga bote ay ginamit muli sa buong mga eksperimento pagkatapos ng naaangkop na paglilinis ayon sa pamamaraang inilarawan ni Denlinger et al. at ang World Health Organization [22, 23].
Sa araw pagkatapos ng paghahanda ng pamatay-insekto, 30–40 ligaw na nahuli na mga lamok (mga gutom na babae) ay inalis mula sa mga kulungan sa mga vial at dahan-dahang hinipan sa bawat vial. Tinatayang parehong bilang ng mga langaw ang ginamit para sa bawat bote na pinahiran ng insecticide, kasama ang control. Ulitin ito kahit lima hanggang anim na beses sa bawat nayon. Pagkatapos ng 40 minutong pagkakalantad sa insecticide, naitala ang bilang ng mga langaw na natumba. Nahuli ang lahat ng langaw gamit ang mechanical aspirator, inilagay sa mga lalagyan ng pint na karton na natatakpan ng pinong mesh, at inilagay sa isang hiwalay na incubator sa ilalim ng parehong mga kondisyon ng halumigmig at temperatura na may parehong mapagkukunan ng pagkain (mga bolang koton na ibinabad sa 30% na solusyon ng asukal) bilang mga hindi ginagamot na kolonya. Ang pagkamatay ay naitala 24 na oras pagkatapos ng pagkakalantad sa insecticide. Ang lahat ng lamok ay hiniwalay at sinuri upang kumpirmahin ang pagkakakilanlan ng mga species. Ang parehong pamamaraan ay isinagawa sa F1 offspring flies. Ang knockdown at mortality rate ay naitala 24 h pagkatapos ng pagkakalantad. Kung ang dami ng namamatay sa mga control bottle ay <5%, walang ginawang mortality correction sa mga replika. Kung ang dami ng namamatay sa control bottle ay ≥ 5% at ≤ 20%, ang dami ng namamatay sa mga test bottle ng replicate na iyon ay naitama gamit ang Abbott's formula. Kung ang dami ng namamatay sa control group ay lumampas sa 20%, ang buong pangkat ng pagsubok ay itinapon [24, 25, 26].
Mean mortality of wild-caught P. argentipes mosquitoes. Ang mga error bar ay kumakatawan sa mga karaniwang error ng mean. Ang intersection ng dalawang pulang pahalang na linya na may graph (90% at 98% mortality, ayon sa pagkakabanggit) ay nagpapahiwatig ng mortality window kung saan maaaring magkaroon ng resistensya.[25]
Mean mortality ng F1 progeny ng wild-caught P. argentipes. Ang mga error bar ay kumakatawan sa mga karaniwang error ng mean. Ang mga kurba na pinag-intersect ng dalawang pulang pahalang na linya (90% at 98% na mortalidad, ayon sa pagkakabanggit) ay kumakatawan sa hanay ng dami ng namamatay kung saan maaaring magkaroon ng paglaban [25].
Ang mga lamok sa control/non-IRS village (Manifulkaha) ay natagpuang napakasensitibo sa mga insecticides. Ang ibig sabihin ng dami ng namamatay (± SE) ng mga ligaw na nahuli na lamok 24 h pagkatapos ng knockdown at pagkakalantad ay 99.47 ± 0.52% at 98.93 ± 0.65%, ayon sa pagkakabanggit, at ang ibig sabihin ng dami ng namamatay ng F1 na supling ay 98.89 ± 1.11% at 98.3% ayon sa pagkakabanggit. 3).
Ang mga resulta ng pag-aaral na ito ay nagpapahiwatig na ang silver-legged sand fly ay maaaring magkaroon ng resistensya sa synthetic pyrethroid (SP) α-cypermethrin sa mga nayon kung saan ang pyrethroid (SP) α-cypermethrin ay regular na ginagamit. Sa kabaligtaran, ang mga langaw na buhangin na may pilak na paa na nakolekta mula sa mga nayon na hindi sakop ng IRS/control program ay nakitang lubhang madaling kapitan. Ang pagsubaybay sa pagkamaramdamin ng mga populasyon ng wild sand fly ay mahalaga para sa pagsubaybay sa pagiging epektibo ng mga insecticides na ginamit, dahil ang impormasyong ito ay maaaring makatulong sa pamamahala ng insecticide resistance. Ang mataas na antas ng resistensya ng DDT ay regular na naiulat sa mga langaw ng buhangin mula sa mga endemic na lugar ng Bihar dahil sa makasaysayang pagpili ng presyon mula sa IRS gamit ang insecticide na ito [1].
Natagpuan namin ang P. argentipes na lubhang sensitibo sa pyrethroids, at ang mga pagsubok sa larangan sa India, Bangladesh at Nepal ay nagpakita na ang IRS ay may mataas na entomological efficacy kapag ginamit kasama ng cypermethrin o deltamethrin [19, 26, 27, 28, 29]. Kamakailan, si Roy et al. Iniulat ng [18] na ang P. argentipes ay nagkaroon ng paglaban sa mga pyrethroid sa Nepal. Ang aming field susceptibility study ay nagpakita na ang mga silverlegged sand flies na nakolekta mula sa non-IRS exposed villages ay lubhang madaling kapitan, ngunit ang mga langaw na kinokolekta mula sa pasulput-sulpot/dating IRS at tuloy-tuloy na IRS villages (ang dami ng namamatay ay mula 90% hanggang 97% maliban sa mga langaw ng buhangin mula sa Anandpur-Haruni na may 89.34% na mortality sa 24 na oras pagkatapos ng exposure). Ang isang posibleng dahilan para sa pag-unlad ng paglaban na ito ay ang pressure na ibinibigay ng panloob na routine spraying (IRS) at case-based na lokal na pag-spray na mga programa, na mga karaniwang pamamaraan para sa pamamahala ng kala-azar outbreaks sa mga endemic na lugar/block/village (Standard Operating Procedure para sa Outbreak Investigation and Management [30]. para sa rehiyong ito, na nakuha gamit ang CDC bottle bioassay, ay hindi magagamit para sa paghahambing; mas madalas kaysa sa mga lamok, at gumugugol ng mas maraming oras sa pakikipag-ugnay sa substrate sa bioassay [23].
Ang mga sintetikong pyrethroid ay ginamit sa VL endemic na mga lugar ng Nepal mula noong 1992, na kahalili ng SPs alpha-cypermethrin at lambda-cyhalothrin para sa sandfly control [31], at ang deltamethrin ay ginamit din sa Bangladesh mula noong 2012 [32]. Ang phenotypic resistance ay nakita sa mga ligaw na populasyon ng silverlegged sandflies sa mga lugar kung saan matagal nang ginagamit ang mga synthetic pyrethroids [18, 33, 34]. Ang isang hindi magkasingkahulugan na mutation (L1014F) ay nakita sa mga ligaw na populasyon ng Indian sandfly at nauugnay sa paglaban sa DDT, na nagmumungkahi na ang pyrethroid resistance ay lumitaw sa antas ng molekular, dahil ang DDT at ang pyrethroid (alpha-cypermethrin) ay nagta-target sa parehong gene sa sistema ng nerbiyos ng insekto [17, 34]. Samakatuwid, ang sistematikong pagtatasa ng pagkamaramdamin ng cypermethrin at pagsubaybay sa resistensya ng lamok ay mahalaga sa panahon ng pag-aalis at pagkatapos ng pagtanggal.
Ang isang potensyal na limitasyon ng pag-aaral na ito ay ang paggamit namin ng CDC vial bioassay upang sukatin ang pagkamaramdamin, ngunit ang lahat ng paghahambing ay gumamit ng mga resulta mula sa mga nakaraang pag-aaral gamit ang WHO bioassay kit. Ang mga resulta mula sa dalawang bioassay ay maaaring hindi direktang maihahambing dahil ang CDC vial bioassay ay sumusukat sa knockdown sa pagtatapos ng diagnostic period, samantalang ang WHO kit bioassay ay sumusukat sa dami ng namamatay sa 24 o 72 oras pagkatapos ng pagkakalantad (ang huli para sa mabagal na kumikilos na mga compound) [35]. Ang isa pang potensyal na limitasyon ay ang bilang ng IRS village sa pag-aaral na ito kumpara sa isang non-IRS at isang non-IRS/dating IRS village. Hindi namin maaaring ipagpalagay na ang antas ng pagkamaramdamin sa vector ng lamok na naobserbahan sa mga indibidwal na nayon sa isang distrito ay kumakatawan sa antas ng pagkamaramdamin sa ibang mga nayon at distrito sa Bihar. Sa pagpasok ng India sa post-elimination phase ng leukemia virus, kailangang pigilan ang makabuluhang pag-unlad ng paglaban. Ang mabilis na pagsubaybay sa paglaban sa mga populasyon ng sandfly mula sa iba't ibang distrito, bloke at heyograpikong lugar ay kinakailangan. Ang data na ipinakita sa pag-aaral na ito ay paunang at dapat ma-verify sa pamamagitan ng paghahambing sa mga konsentrasyon ng pagkakakilanlan na inilathala ng World Health Organization [35] upang makakuha ng isang mas tiyak na ideya ng katayuan ng pagkamaramdamin ng P. argentipes sa mga lugar na ito bago baguhin ang mga programa sa pagkontrol ng vector upang mapanatili ang mababang populasyon ng sandfly at suportahan ang pag-aalis ng leukemia virus.
Ang lamok na P. argentipes, ang vector ng leukosis virus, ay maaaring magsimulang magpakita ng mga maagang palatandaan ng paglaban sa napakabisang cypermethrin. Ang regular na pagsubaybay sa paglaban sa insecticide sa mga ligaw na populasyon ng P. argentipes ay kinakailangan upang mapanatili ang epidemiological na epekto ng mga interbensyon sa pagkontrol ng vector. Ang pag-ikot ng mga pamatay-insekto na may iba't ibang paraan ng pagkilos at/o pagsusuri at pagpaparehistro ng mga bagong pamatay-insekto ay kinakailangan at inirerekomenda upang pamahalaan ang paglaban sa pamatay-insekto at suportahan ang pag-aalis ng leukosis virus sa India.
Oras ng post: Peb-17-2025