Ang Visceral leishmaniasis (VL), na kilala bilang kala-azar sa subkontinente ng India, ay isang parasitikong sakit na dulot ng flagellated protozoan na Leishmania na maaaring nakamamatay kung hindi agad magagamot. Ang sandfly na Phlebotomus argentipes ang tanging kumpirmadong tagapagdala ng VL sa Timog-silangang Asya, kung saan ito ay kinokontrol ng indoor residual spraying (IRS), isang sintetikong insecticide. Ang paggamit ng DDT sa mga programa sa pagkontrol ng VL ay nagresulta sa pagkakaroon ng resistensya sa mga sandflies, kaya ang DDT ay napalitan ng insecticide na alpha-cypermethrin. Gayunpaman, ang alpha-cypermethrin ay gumagana nang katulad ng DDT, kaya ang panganib ng resistensya sa mga sandflies ay tumataas sa ilalim ng stress na dulot ng paulit-ulit na pagkakalantad sa insecticide na ito. Sa pag-aaral na ito, sinuri namin ang pagiging madaling kapitan ng mga ligaw na lamok at ng kanilang mga F1 na supling gamit ang CDC bottle bioassay.
Nakakolekta kami ng mga lamok mula sa 10 nayon sa distrito ng Muzaffarpur sa Bihar, India. Walong nayon ang patuloy na gumagamit ng high-potency.sipermethrinPara sa panloob na pag-iispray, isang nayon ang tumigil sa paggamit ng high-potency cypermethrin para sa panloob na pag-iispray, at isang nayon ang hindi kailanman gumamit ng high-potency cypermethrin para sa panloob na pag-iispray. Ang mga nakolektang lamok ay inilantad sa isang paunang natukoy na diagnostic dose sa loob ng isang takdang oras (3 μg/ml sa loob ng 40 minuto), at ang knockdown rate at mortality ay naitala 24 oras pagkatapos ng pagkakalantad.
Ang mga rate ng pagkamatay ng mga ligaw na lamok ay mula 91.19% hanggang 99.47%, at ang mga nasa kanilang henerasyon ng F1 ay mula 91.70% hanggang 98.89%. Dalawampu't apat na oras pagkatapos ng pagkakalantad, ang pagkamatay ng mga ligaw na lamok ay mula 89.34% hanggang 98.93%, at ang sa kanilang henerasyon ng F1 ay mula 90.16% hanggang 98.33%.
Ang mga resulta ng pag-aaral na ito ay nagpapahiwatig na maaaring magkaroon ng resistensya ang P. argentipes, na nagpapahiwatig ng pangangailangan para sa patuloy na pagsubaybay at pagbabantay upang mapanatili ang kontrol kapag nakamit na ang pagpuksa.
Ang Visceral leishmaniasis (VL), na kilala bilang kala-azar sa subkontinente ng India, ay isang parasitikong sakit na dulot ng flagellated protozoan na Leishmania at naililipat sa pamamagitan ng kagat ng mga nahawaang babaeng sand fly (Diptera: Myrmecophaga). Ang mga sand fly ang tanging kumpirmadong tagapagdala ng VL sa Timog-silangang Asya. Malapit nang makamit ng India ang layuning maalis ang VL. Gayunpaman, upang mapanatili ang mababang antas ng insidente pagkatapos ng pagpuksa, mahalagang bawasan ang populasyon ng tagapagdala upang maiwasan ang potensyal na pagkalat.
Ang pagkontrol ng lamok sa Timog-silangang Asya ay naisasagawa sa pamamagitan ng indoor residual spraying (IRS) gamit ang mga sintetikong insecticide. Ang palihim na pag-uugali ng mga silverleg sa pagpapahinga ay ginagawa itong angkop na target para sa pagkontrol ng insecticide sa pamamagitan ng indoor residual spraying [1]. Ang indoor residual spraying ng dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT) sa ilalim ng National Malaria Control Programme sa India ay nagkaroon ng malaking epekto sa pagkontrol ng populasyon ng lamok at makabuluhang pagbawas ng mga kaso ng VL [2]. Ang hindi planadong pagkontrol na ito ng VL ang nag-udyok sa Indian VL Eradication Programme na gamitin ang indoor residual spraying bilang pangunahing paraan ng pagkontrol ng silverlegs. Noong 2005, ang mga pamahalaan ng India, Bangladesh, at Nepal ay pumirma ng isang memorandum of understanding na may layuning alisin ang VL pagsapit ng 2015 [3]. Ang mga pagsisikap sa pagpuksa, na kinasasangkutan ng kombinasyon ng vector control at mabilis na pagsusuri at paggamot ng mga kaso ng tao, ay naglalayong pumasok sa consolidation phase pagsapit ng 2015, isang target na kalaunan ay binago sa 2017 at pagkatapos ay sa 2020.[4] Ang bagong pandaigdigang roadmap upang maalis ang mga napabayaang tropikal na sakit ay kinabibilangan ng pag-aalis ng VL pagsapit ng 2030.[5]
Habang papasok ang India sa yugto ng post-eradication ng BCVD, mahalagang tiyakin na hindi bubuo ang malaking resistensya sa beta-cypermethrin. Ang dahilan ng resistensya ay ang parehong mekanismo ng pagkilos ng DDT at cypermethrin, na siyang target ng mga ito ang VGSC protein[21]. Kaya naman, ang panganib ng pagkakaroon ng resistensya sa mga sandflies ay maaaring tumaas dahil sa stress na dulot ng regular na pagkakalantad sa napakalakas na cypermethrin. Samakatuwid, mahalagang subaybayan at tukuyin ang mga potensyal na populasyon ng sandflies na lumalaban sa insecticide na ito. Sa kontekstong ito, ang layunin ng pag-aaral na ito ay subaybayan ang katayuan ng pagiging sensitibo ng mga ligaw na sandflies gamit ang mga diagnostic dose at mga tagal ng pagkakalantad na tinukoy nina Chaubey et al. [20] at pinag-aralan ang P. argentipes mula sa iba't ibang nayon sa distrito ng Muzaffarpur ng Bihar, India, na patuloy na gumagamit ng mga indoor spraying system na ginamot gamit ang cypermethrin (mga tuluy-tuloy na nayon ng IPS). Ang katayuan ng pagiging madaling kapitan ng mga ligaw na P. argentipes mula sa mga nayon na tumigil sa paggamit ng mga sistema ng pag-spray sa loob ng bahay na ginamot ng cypermethrin (mga dating nayon ng IPS) at iyong mga hindi pa gumagamit ng mga sistema ng pag-spray sa loob ng bahay na ginamot ng cypermethrin (mga nayon na hindi IPS) ay inihambing gamit ang CDC bottle bioassay.
Sampung nayon ang napili para sa pag-aaral (Larawan 1; Talahanayan 1), kung saan walo ang may kasaysayan ng patuloy na panloob na pag-ispray ng mga sintetikong pyrethroid (hypermethrin; itinalaga bilang patuloy na mga nayon ng hypermethrin) at may mga kaso ng VL (hindi bababa sa isang kaso) sa nakalipas na 3 taon. Sa natitirang dalawang nayon sa pag-aaral, isang nayon na hindi nagpatupad ng panloob na pag-ispray ng beta-cypermethrin (hindi panloob na nayon ng pag-ispray) ang napili bilang control village at ang isa pang nayon na may paulit-ulit na panloob na pag-ispray ng beta-cypermethrin (paulit-ulit na panloob na pag-ispray ng nayon/dating panloob na nayon ng pag-ispray) ang napili bilang control village. Ang pagpili ng mga nayon na ito ay batay sa koordinasyon sa Kagawaran ng Kalusugan at sa Indoor Spraying Team at pagpapatunay ng Indoor Spraying Micro Action Plan sa Distrito ng Muzaffarpur.
Mapang heograpikal ng distrito ng Muzaffarpur na nagpapakita ng mga lokasyon ng mga nayon na kasama sa pag-aaral (1–10). Mga lokasyon ng pag-aaral: 1, Manifulkaha; 2, Ramdas Majhauli; 3, Madhubani; 4, Anandpur Haruni; 5, Pandey; 6, Hirapur; 7, Madhopur Hazari; 8, Hamidpur; 9, Noonfara; 10, Simara. Ang mapa ay inihanda gamit ang QGIS software (bersyon 3.30.3) at Open Assessment Shapefile.
Ang mga bote para sa mga eksperimento sa pagkakalantad ay inihanda ayon sa mga pamamaraan nina Chaubey et al. [20] at Denlinger et al. [22]. Sa madaling salita, ang 500 mL na bote ng salamin ay inihanda isang araw bago ang eksperimento at ang panloob na dingding ng mga bote ay pinahiran ng ipinahiwatig na insecticide (ang diagnostic dose ng α-cypermethrin ay 3 μg/mL) sa pamamagitan ng paglalagay ng acetone solution ng insecticide (2.0 mL) sa ilalim, dingding, at takip ng mga bote. Ang bawat bote ay pinatuyo sa isang mechanical roller sa loob ng 30 minuto. Sa panahong ito, dahan-dahang tanggalin ang takip upang hayaang sumingaw ang acetone. Pagkatapos ng 30 minutong pagpapatuyo, tanggalin ang takip at iikot ang bote hanggang sa matuyo ang lahat ng acetone. Ang mga bote ay iniwang bukas upang matuyo magdamag. Para sa bawat replicate test, isang bote, na ginamit bilang control, ay pinahiran ng 2.0 mL ng acetone. Lahat ng bote ay muling ginamit sa buong eksperimento pagkatapos ng naaangkop na paglilinis ayon sa pamamaraang inilarawan nina Denlinger et al. at ng World Health Organization [22, 23].
Kinabukasan pagkatapos ng paghahanda ng insecticide, 30-40 na nahuling lamok mula sa kagubatan (mga babaeng gutom na gutom) ang inalis mula sa mga kulungan gamit ang mga vial at dahan-dahang hinipan sa bawat vial. Humigit-kumulang parehong bilang ng mga langaw ang ginamit para sa bawat bote na may patong na insecticide, kasama na ang kontrol. Ulitin ito nang hindi bababa sa lima hanggang anim na beses sa bawat nayon. Pagkatapos ng 40 minutong pagkakalantad sa insecticide, itinala ang bilang ng mga langaw na natumba. Lahat ng langaw ay hinuli gamit ang isang mechanical aspirator, inilagay sa mga lalagyang karton na natatakpan ng pinong mesh, at inilagay sa isang hiwalay na incubator sa ilalim ng parehong kondisyon ng humidity at temperatura na may parehong pinagkukunan ng pagkain (mga bolang bulak na ibinabad sa 30% na solusyon ng asukal) gaya ng mga hindi ginamot na kolonya. Ang mortalidad ay naitala 24 oras pagkatapos malantad sa insecticide. Lahat ng lamok ay dine-dissect at sinuri upang kumpirmahin ang pagkakakilanlan ng species. Ang parehong pamamaraan ay isinagawa sa mga F1 na supling na langaw. Ang mga knockdown at mortality rate ay naitala 24 oras pagkatapos malantad. Kung ang mortalidad sa mga control bottle ay < 5%, walang ginawang pagwawasto ng mortalidad sa mga replicate. Kung ang mortalidad sa control bottle ay ≥ 5% at ≤ 20%, ang mortalidad sa mga test bottle ng replicate na iyon ay itinama gamit ang formula ni Abbott. Kung ang mortalidad sa control group ay lumampas sa 20%, ang buong test group ay itatapon [24, 25, 26].
Karaniwang mortalidad ng mga nahuling lamok na P. argentipes sa kagubatan. Ang mga error bar ay kumakatawan sa mga karaniwang error ng karaniwan. Ang interseksyon ng dalawang pulang pahalang na linya sa graph (90% at 98% na mortalidad, ayon sa pagkakabanggit) ay nagpapahiwatig ng palugit ng mortalidad kung saan maaaring magkaroon ng resistensya.[25]
Karaniwang mortalidad ng mga supling ng F1 ng mga nahuling P. argentipes sa kagubatan. Ang mga error bar ay kumakatawan sa mga karaniwang error ng karaniwan. Ang mga kurba na pinagtagpo ng dalawang pulang pahalang na linya (90% at 98% na mortalidad, ayon sa pagkakabanggit) ay kumakatawan sa saklaw ng mortalidad kung saan maaaring magkaroon ng resistensya [25].
Ang mga lamok sa control/non-IRS village (Manifulkaha) ay natuklasang lubos na sensitibo sa mga insecticide. Ang mean mortality (±SE) ng mga lamok na nahuli sa ligaw 24 oras pagkatapos ng knockdown at exposure ay 99.47 ± 0.52% at 98.93 ± 0.65%, ayon sa pagkakabanggit, at ang mean mortality ng mga F1 supling ay 98.89 ± 1.11% at 98.33 ± 1.11%, ayon sa pagkakabanggit (Talahanayan 2, 3).
Ang mga resulta ng pag-aaral na ito ay nagpapahiwatig na ang mga silver-legged sand fly ay maaaring magkaroon ng resistensya sa sintetikong pyrethroid (SP) α-cypermethrin sa mga nayon kung saan regular na ginagamit ang pyrethroid (SP) α-cypermethrin. Sa kabaligtaran, ang mga silver-legged sand fly na nakolekta mula sa mga nayon na hindi sakop ng programa ng IRS/kontrol ay natagpuang lubos na madaling kapitan. Ang pagsubaybay sa pagkamaramdamin ng mga populasyon ng mga ligaw na sand fly ay mahalaga para sa pagsubaybay sa bisa ng mga insecticide na ginamit, dahil ang impormasyong ito ay maaaring makatulong sa pamamahala ng resistensya sa insecticide. Ang mataas na antas ng resistensya sa DDT ay regular na naiuulat sa mga sand fly mula sa mga endemikong lugar ng Bihar dahil sa makasaysayang pagpili ng mga insecticide mula sa IRS gamit ang insecticide na ito [1].
Natuklasan namin na ang P. argentipes ay lubhang sensitibo sa mga pyrethroid, at ang mga pagsubok sa field sa India, Bangladesh at Nepal ay nagpakita na ang IRS ay may mataas na epektibidad sa entomolohiya kapag ginamit kasama ng cypermethrin o deltamethrin [19, 26, 27, 28, 29]. Kamakailan lamang, iniulat nina Roy et al. [18] na ang P. argentipes ay nagkaroon ng resistensya sa mga pyrethroid sa Nepal. Ipinakita ng aming pag-aaral sa field susceptibility na ang mga silverlegged sand fly na nakolekta mula sa mga nayon na hindi nakalantad sa IRS ay lubhang madaling kapitan, ngunit ang mga langaw na nakolekta mula sa mga nayon na intermittent/dating IRS at patuloy na IRS (ang mortality ay mula 90% hanggang 97% maliban sa mga sand fly mula sa Anandpur-Haruni na may 89.34% na mortality sa 24 oras pagkatapos ng pagkakalantad) ay malamang na lumalaban sa lubos na epektibong cypermethrin [25]. Isang posibleng dahilan para sa pag-unlad ng resistensyang ito ay ang presyur na dulot ng indoor routine spraying (IRS) at mga case-based local spraying program, na mga karaniwang pamamaraan para sa pamamahala ng mga kala-azar outbreak sa mga endemikong lugar/bloke/village (Standard Operating Procedure for Outbreak Investigation and Management [30]. Ang mga resulta ng pag-aaral na ito ay nagbibigay ng mga maagang indikasyon ng pag-unlad ng selective pressure laban sa lubos na epektibong cypermethrin. Sa kasamaang palad, ang mga datos ng historical susceptibility para sa rehiyong ito, na nakuha gamit ang CDC bottle bioassay, ay hindi magagamit para sa paghahambing; lahat ng nakaraang pag-aaral ay sinusubaybayan ang susceptibility ng P. argentipes gamit ang papel na pinapagbinhi ng insecticide ng WHO. Ang mga diagnostic dose ng insecticide sa mga test strip ng WHO ay ang mga inirerekomendang konsentrasyon ng identification ng mga insecticide para gamitin laban sa mga malaria vector (Anopheles gambiae), at ang operational applicability ng mga konsentrasyong ito sa mga sandflies ay hindi malinaw dahil ang mga sandflies ay mas madalang lumipad kaysa sa mga lamok, at gumugugol ng mas maraming oras sa pakikipag-ugnayan sa substrate sa bioassay [23].
Ang mga sintetikong pyrethroid ay ginamit sa mga lugar na endemiko sa VL sa Nepal simula noong 1992, na sinasalit-salit sa SPs na alpha-cypermethrin at lambda-cyhalothrin para sa pagkontrol ng sandfly [31], at ang deltamethrin ay ginamit din sa Bangladesh simula noong 2012 [32]. Ang phenotypic resistance ay natukoy sa mga ligaw na populasyon ng silverlegged sandfly sa mga lugar kung saan ang mga sintetikong pyrethroid ay matagal nang ginagamit [18, 33, 34]. Isang di-kasingkahulugan na mutation (L1014F) ang natukoy sa mga ligaw na populasyon ng Indian sandfly at naiugnay sa resistensya sa DDT, na nagmumungkahi na ang resistensya sa pyrethroid ay lumilitaw sa antas ng molekula, dahil ang parehong DDT at ang pyrethroid (alpha-cypermethrin) ay nagta-target sa parehong gene sa nervous system ng insekto [17, 34]. Samakatuwid, ang sistematikong pagtatasa ng susceptibility ng cypermethrin at pagsubaybay sa resistensya ng lamok ay mahalaga sa mga panahon ng pagpuksa at pagkatapos ng pagpuksa.
Isang potensyal na limitasyon ng pag-aaral na ito ay ang paggamit namin ng CDC vial bioassay upang sukatin ang susceptibility, ngunit lahat ng paghahambing ay gumamit ng mga resulta mula sa mga nakaraang pag-aaral gamit ang WHO bioassay kit. Ang mga resulta mula sa dalawang bioassay ay maaaring hindi direktang maihahambing dahil ang CDC vial bioassay ay sumusukat ng knockdown sa pagtatapos ng panahon ng diagnostic, samantalang ang WHO kit bioassay ay sumusukat ng mortalidad sa loob ng 24 o 72 oras pagkatapos ng exposure (ang huli ay para sa mga slow-acting compound) [35]. Ang isa pang potensyal na limitasyon ay ang bilang ng mga nayon ng IRS sa pag-aaral na ito kumpara sa isang non-IRS at isang non-IRS/dating nayon ng IRS. Hindi natin maaaring ipagpalagay na ang antas ng susceptibility ng lamok na naobserbahan sa mga indibidwal na nayon sa isang distrito ay kumakatawan sa antas ng susceptibility sa ibang mga nayon at distrito sa Bihar. Habang papasok ang India sa post-elimination phase ng leukemia virus, mahalagang pigilan ang makabuluhang pag-unlad ng resistensya. Kinakailangan ang mabilis na pagsubaybay sa resistensya sa mga populasyon ng sandfly mula sa iba't ibang distrito, bloke, at heograpikong lugar. Ang mga datos na inilahad sa pag-aaral na ito ay paunang datos lamang at dapat na beripikahin sa pamamagitan ng paghahambing sa mga konsentrasyon ng pagkakakilanlan na inilathala ng World Health Organization [35] upang makakuha ng mas tiyak na ideya sa katayuan ng pagiging madaling kapitan ng P. argentipes sa mga lugar na ito bago baguhin ang mga programa sa pagkontrol ng vector upang mapanatili ang mababang populasyon ng sandfly at suportahan ang pag-aalis ng leukemia virus.
Ang lamok na P. argentipes, ang tagapagdala ng leukosis virus, ay maaaring magsimulang magpakita ng mga maagang senyales ng resistensya sa lubos na mabisang cypermethrin. Ang regular na pagsubaybay sa resistensya sa insecticide sa mga ligaw na populasyon ng P. argentipes ay kinakailangan upang mapanatili ang epidemiological na epekto ng mga interbensyon sa pagkontrol ng vector. Ang pagpapalit-palit ng mga insecticide na may iba't ibang paraan ng pagkilos at/o pagsusuri at pagpaparehistro ng mga bagong insecticide ay kinakailangan at inirerekomenda upang mapamahalaan ang resistensya sa insecticide at suportahan ang pag-aalis ng leukosis virus sa India.
Oras ng pag-post: Pebrero 17, 2025